蛍光色素に求められる性能について
特徴的な励起波長や蛍光波長(ストークスシフト)、pH依存性が低い、蛍光強度が高い、光安定性が高い、溶解性(水溶性)などが性能指標のようです。
1波長で複数の蛍光波長の色素を励起できる性質があると特殊な使い方が出来るようです。
決まった構造の合成については弊社は専門家を自負していますが、蛍光色素の性能と構造の関連については十分理解できているとは言えません。鋭意勉強中です。
Rhodamine系はFluoresceinとOをNに置換したRhodamineに分かれますが、後者の方がPH依存性が低く、光安定性が高いそうです。この改良版のAlexa、HiLyte Fluorなどが近年、良く用いられているようです。
Cyanine系:スルホン酸を有することで高水溶性、蛍光減退の抑制効果があるのが特徴です。
BODIPY系:pH、溶媒の種類を問わず吸収波長、発光波長が共に安定していることが特徴です。またストークスシフトが他と比べて大きく、鋭いスペクトルが有意性となっています。
タンパク、抗体などの可視化の有効な手段として色素標識、蛍光標識が頻繁に用いられています。
大抵は色素化合物のNHS活性化体とアミノ基を反応させるだけという簡単な操作で実現できますが、専用設備と技術を要するため合成や精製が難しいということで弊社へのご依頼件数が増加傾向にあります。
- 色素標識化合物の純度に問題:安定性に問題があったり異性体混合物のこともあり、生成物の同定が困難。
- 標識する化合物や色素標識化合物に反応点が複数あり、反応の制御が難しい。
- アミド化以外の方法で結合させたい(Michael付加、Click、エステル化等)が、レシピ通りに作業してもうまくいかない。
- 市販で入手できない構造の蛍光標識化合物を短期間に欲しいが外部委託しても長い納期がかかってしまう。
- 色素標識体に溶解性の高いリンカー、スペーサーを挿入したい。
- 親水性を高めた構造が欲しい。
- 色素標識化合物の末端を別の官能基に置換したい。
弊社ではここ数年蛍光標識のご依頼が急増しており、様々なご要望のお応えするべく新しい構造の蛍光色素化合物の開発に力を入れています。
弊社で合成実績があっても秘密保持契約のために公開できない化合物も多数あります。
一覧にない場合でもご希望の構造がございましたらお気軽にお問い合わせください。
- 海外メーカーで市販品はあるが高価または入手手続きが面倒
- 市販の蛍光試薬の改良構造(ここをこういう風に替えたら)であれば使いやすい。
- 蛍光物質に求められる性能(水溶性を高めたい、励起波長を長波長側にシフトしたい、など)
- 汎用性のある構造についてご提案に沿った構造の蛍光標識化合物が初めて合成できた場合、最少量(0.1㎎~1㎎程度)を評価用として無償提供させて頂く場合がございます。
- 蛍光標識化合物を用いて誘導体化(例えばNHS化合物とアミド結合形成)する場合、新規でなくても弊社HP一覧の化合物(弊社開発品)につきましては原料費をゼロ(無償提供)させて頂く場合がございますので併せてご検討ください。